分子筛结果解读

分子筛结果解读

尺寸排阻色谱(SEC)也称为凝胶色谱,俗称分子筛。当洗脱液为水溶液或缓冲液时,称为凝胶过滤色谱(GFC),在生物学领域应用广泛;当使用有机溶剂作为洗脱液时,称为凝胶渗透色谱(GPC),被广泛用于高分子领域。尺寸排阻色谱通常用于分离高分子化合物,如组织提取物、多肽、蛋白质和核酸。

尺寸排阻色谱基于蛋白质分子量或分子形状的差异对样品进行分离。当样品从色谱柱顶部向下移动时,大的蛋白质分子无法进入凝胶颗粒并被快速洗脱;而较小的蛋白质分子可以进入凝胶颗粒,并且较小的蛋白质进入凝胶的保留时间不同。分子量越大,洗脱时间越早,从而使具有不同分子大小的蛋白质被分离。

图1.体积排阻色谱法原理(Wolf et al, 2015)

在蛋白分离纯化中也常用到分子筛,主要有两个作用,一是分离纯化;二是蛋白分析,新手接触的时候不知道怎么去分析分子筛结果,下面以不同的实例解读一下些各自的区别。

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